PCR y LMA

Tema: Prevalencia de mutaciones FLT3 en LMA
Objetivo: Analizar la prevalencia de los distintos tipos de mutaciones en el gen FLT3 en pacientes con LMA
Muestra: Muestras de Sangre Periférica  y/o de Médula Ósea
Extracción del ácido nucleico: RNA total celular
Gen Amplia: FLT3
Tipo de PCR: RT-PCR Multiplex
Pasos: por 35 ciclos

Desnaturalización inicial: 5 minutos a 94°C
Desnaturalización: 30 segundos a 95°C

Hibridación: 45 segundos a 56°C

Extensión: 30 segundos a 72°C
Extensión final: 10 minutos a 72°C

Enzima de Restricción: EcoRV (Promega)

Análisis Viral: Electroforesis en gel de Agarosa al 3% y tinción con Bromuro de Etidio

Bibliografía:
http://www.cobico.com.ar/wp-content/archivos/PREVALENCIA-DE-MUTACIONES-FLT3-EN-LMA_Correccion.pdf
http://tododelapcr.files.wordpress.com/2011/11/pcr-lab.jpg
http://www.udg.edu/Portals/86/STR/UBM/img%20PCR/PCR%20-%20Esquema%20de%20PCR%202.gif